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Inhalt

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Grundlagen zur chemischen Reaktion zwischen Biotin und Streptavidin

4

Ist eine Charakterisierung möglich?

4

Biotin, was ist das?

4

Streptavidin

4

Wie reagieren die beiden Proteine miteinander?

5

Molekülmassen im Verhältnis

5

Wie messe ich die Reaktion?

6

Biotin mit Fluoreszenzrest

6

Was ist Fluoreszenz?

6

Versuchsaufbau

7

Überprüfung des Versuchsaufbaus mithilfe eines Farbstoffes

8

Messung zur Untersuchung des Fluoreszenzabfalls bei Zugabe von Streptavidin

8

Ungenauigkeiten in der Messreihe

9

Intensitätsvariation der Fluoreszenz nicht berücksichtigt

9

Lösung

9

Messungen zur Intensitätsvariation und Verdünnung durch dest. Wasser

9

Messreihe zur Temperaturabhängigkeit des Komplexes

11

Darstellung der Fluoreszenzintensität nach der Reaktion bei versch. Temperaturen

11

Schlussfolgerung

11

Messreihe zur Konzentrationsabhängigkeit des Komplexes

12

Halbe und doppelte Konzentration an Streptavidin

12

Problem

13

Weitere Konzentrationen

13

Interpretation der Messreihen

13

Spektrometeraufnahmen bei verschiedenen Konzentrationen

14

Abschätzen systematischer Fehler

15

Fazit und Ausblick

15

Übertragung auf Forschung im Organismus

15

Danksagung

17

Quellen

18

Literaturverzeichnis

18

Anhang

19

Funktion zur Berechnung der Anzahl an freien Biotinmolekülen

19

Temperaturabhängige Messungen im Einzelnen:

20

Konzentrationsabhängige Messungen bei unterschiedlichen Temperaturen:.........

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