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Folgende Oxidationsmittel werden als Reagenzien eingesetzt:
• Eisen(III)-Thiocyanat-Lösung,
• Iod-Lösung, mit Stärke angefärbt
• Silbernitrat - Lösung.
Eisen(III)-Thiocyanat wird zum Eisen(II)-Thiocyanat, Iod-Lösung wird zum Iodid reduziert.
Dies ist am Farbumschlag erkennbar, im ersten Fall wird die blutrote Eisen(III)-Thiocyanat-
Lösung entfärbt, im zweiten Fall die mit Stärke blau gefärbte Iod- Lösung entfärbt.
Silberionen werden zu elementarem Silber reduziert, dies sieht fein verteilt schwarz aus.
Nachweis von Cellulose mit Zinkchlorid-Iod-Lösung (Chlorzink-Iod-Lösung):
Cellulose ergibt mit Zinkchlorid-Iod- Lösung eine blauschwarze Einschlussverbindung.
Cellulose reagiert nicht mit Iod-Kaliumiodid-Lösung nach Lugol. Das Zinkchlorid bewirkt ein
Aufquellen der Cellulose-Struktur, so dass sich die Iod-Moleküle einlagern können und den
blau-violetten Anlagerungskomplex bilden können. Die Farbtönung ist von der Struktur der
Cellulose abhängig.
Nachweis von Aceton mit Natriumnitroprussid (Aceton Reagenz):
1 Tropfen Probe wird mit einer Mikrospatel-Spitze Aceton-Reagenz gemischt. Bei
Anwesenheit von Aceton tritt nach wenigen Minuten ein Farbumschlag nach violett auf. Die
Farbreaktion beruht auf der Bildung von violetten Isonitrosoaceton. Dieses Reagenz hat
gegenüber der Standardmethode nach Legal nicht nur den Vorteil der langen Haltbarkeit, es
ist auch wegen dem geringen Anteil an Natriumnitroprussid nicht als giftig eingestuft.
Nachweis von Aceton mit der Iodoform-Probe:
Propanon (Aceton) reagiert mit Natronlauge und Iod-Lösung unter Bildung von Jodoform
(Triiodmethan) Es ist ein gelber wasserunlöslicher Feststoff mit den typischen
„Apothekengeruch“
CH
3
-CO – CH
3
+ 3 I
2
+ 4 NaOH → CHI
3
↓ + CH
3
COONa + 3 NaI + 3 H
2
O
Protein-Nachweis Prinzip Eiweißfehler von pH-Indikatoren
Prinzip Eiweißfehler von pH-Indikatoren
Der pH-Indikator Bromphenolblau liegt bei einem pH-Wert bis 3,0 als gelbe nicht dissoziierte
Säure vor. Bei einem pH-Wert über 4,6 liegt das blaue dissoziierte Anion vor.
Zwischen pH 3,1 – 4,5 liegt eine grüne Mischfarbe vor.
Der Teststreifen enthält Bromphenolblau und einen Puffer von pH 3,0.
Bei einem pH- Wert von 3,0 liegen Albumine in protonisierter Form vor. Diese reagieren mit
dem Anion des Bromphenolblaus, es entstehen Salze. Die Intensität der grünen Mischfarbe ist
von der Proteinkonzentration abhängig
Die zu untersuchende Probe wird mit einer Pufferlösung von pH 3 versetzt. Bei diesem pH-
Wert liegt das Albumin protonisiert vor, das heißt an die Aminogruppe ist das Hydronium-Ion
(NH
3
+
) gebunden. Diese reagiert mit dem Indikator-Anion unter Bildung eines Komplexes.
Bromphenolblau
H-Ind
→
H
+
+ Ind
-
pH < 3,0 gelb.
pH > 4,6 blau
R – NH
3
+
+ Ind
-
→ Blaugrünes Salz
Modifizierte Methode nach Weichselbaum
Due Biuret-Reaktion wird auch im klinischen Labor zur Bestimmung der Gesamteiweiß-
Konzentration im Serum angewendet. Diese Lösung enthält Kupfersulfat,
Kaliumnatriumtartrat, Kaliumiodid und Natronlauge. Kaliumnatriumtartrat verhindert als